質粒轉染，相信大家都不會陌生，在我們進行哺乳動物細胞蛋白表達和昆蟲細胞表達中都會用到這個過程，可以說轉染的效果直接影響到我們后期實驗的成敗。今天普健生物就和大家具體聊聊質粒轉染以及在操作過程中需要注意到的一些事項，以便于大家更好地進行實驗。

　　昆蟲細胞擴大轉染

　　1、挑選狀態(tài)良好的細胞(選取活力在98%以上且在生長期內的)，將其放置于細胞培養(yǎng)的六孔板上，平均90萬/空孔;

　　2、將細胞房在29度的培養(yǎng)皿上靜置半小時，在細胞完全貼壁后再進行轉染;

　　3、轉染;

　　4、轉染體系之后，再將其放置在室溫下培養(yǎng)半小時以上;

　　5、孵育完成之后，再將其滴加到準備好的6孔板中;

　　6、在六孔板內培養(yǎng)4-6天后，取其上清液即可得P1代病毒;

　　轉染過程中需要注意哪些事項?

　　1、細胞的密度

　　一般保持細胞密度在70%-90%時進行轉染最好，過高或過低都會對轉染的效果造成影響(細胞鋪板和轉染最好當天進行);

　　2、細胞的狀態(tài)

　　盡量選擇適度傳代的細胞，而且不同批次的實驗也盡量選擇相同傳代次數(shù)的細胞。而且細胞盡量保持均勻且密度一致，盡量確保不要選擇被支原體污染的細胞;

　　3、細胞種類的選擇

　　不同的細胞在做轉染是所需要的體系是各不相同的，如果我們在一種體系上使用不同的細胞，納米，其所得的結果是各不相同的。所以，同一種體系，盡量用同一種細胞;

　　4、轉染試劑選擇

　　試劑的選擇一般我們都要遵循高效、方便、低價、低毒，一般來說，每種轉染試劑都有相應的成功文獻，我們完全可以按照那個來選擇;

　　質粒轉染雖然是基礎性的實驗，但是，它卻制約著我們的實驗是否成功的關鍵，所以，還是要花費不少心思的。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供哺乳動物細胞表達以及昆蟲細胞表達服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。