大腸桿菌作為最早用來(lái)生產(chǎn)蛋白的一種方式，為我們的健康起到了非常大的作用。如果采用大腸桿菌來(lái)作為宿主生物，它具備生長(zhǎng)快速、親公司那個(gè)實(shí)現(xiàn)以及外源DNA轉(zhuǎn)化快速等優(yōu)點(diǎn)，使得它的使用非常的廣泛。但是，我們?nèi)粘Ｔ诖竽c桿菌生產(chǎn)的過(guò)程中嘗嘗會(huì)遇到一些小問(wèn)題，導(dǎo)致所產(chǎn)生的蛋白達(dá)不到我們的要求，今天，普健生物就在這里和大家具體聊聊大腸桿菌重組蛋白表達(dá)。

　　1、質(zhì)粒的選擇

　　我們常說(shuō)的質(zhì)粒包括復(fù)制子、啟動(dòng)子、選擇標(biāo)記、多個(gè)克隆位點(diǎn)等，因?yàn)樾枰x擇的選項(xiàng)比較多，而且表達(dá)載體的目錄比較大，所以，我們時(shí)常會(huì)出現(xiàn)選擇出錯(cuò)的情況。這個(gè)時(shí)候，我們就需要根據(jù)個(gè)人的需求去仔細(xì)選擇，這樣才能避免相關(guān)問(wèn)題的出現(xiàn);

　　2、復(fù)制子

　　復(fù)制子其實(shí)就是由一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)和相應(yīng)的順式作用控制元件所組成，而我們?nèi)粘９ぷ髦邢胍x擇合適的載體時(shí)，最需要注意的一個(gè)重要參數(shù)就是基因拷貝數(shù)，而基因拷貝數(shù)的控制權(quán)則位于復(fù)制子中。高質(zhì)粒數(shù)量的復(fù)制子在極大程度上會(huì)造成代謝負(fù)擔(dān)的提升，可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)菌的生長(zhǎng)速度出現(xiàn)降低的現(xiàn)象，而且可能會(huì)造成質(zhì)粒不穩(wěn)定的現(xiàn)象，最終導(dǎo)致用于蛋白合成的健康生物數(shù)量下降;

　　3、其他可能遇到的問(wèn)題

　　雖然說(shuō)現(xiàn)在可以通過(guò)一定的手段來(lái)實(shí)現(xiàn)在短期內(nèi)處理數(shù)百種蛋白，但是這項(xiàng)技術(shù)存在著一定的局限性，需要在后期的實(shí)驗(yàn)中不斷改進(jìn)。而且對(duì)于大部分的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō)，自動(dòng)化平臺(tái)相對(duì)昂貴，價(jià)格相對(duì)來(lái)說(shuō)難以承受;

　　總的來(lái)說(shuō)，大腸桿菌蛋白表達(dá)所具備的優(yōu)勢(shì)是無(wú)與倫比的，因?yàn)槠渲芷诙?、操作?jiǎn)單、失敗率低的情況，只要我們做好相應(yīng)的準(zhǔn)備工作，按照程序來(lái)設(shè)計(jì)，這樣就能在極大程度上降低其失敗的情況。更多蛋白表達(dá)的相關(guān)知識(shí)，敬請(qǐng)關(guān)注普健生物。