近年來，基于基因工程原理發(fā)展起來的報告基因技術逐漸成為最具有發(fā)展?jié)摿蚍治龉ぞ咧弧?/p>

報告基因

報告基因是一類編碼可供檢測的酶與蛋白的基因，是現代分子生物學研究領域中用于分析基因轉錄和調控的一種便捷工具，可用來分析結構基因旁側區(qū)域潛在的順式元件（如啟動子、增強子和沉默子等）和反式作用因子間的相互作用關系。

啟動子是真核基因轉錄起始位點上游一段長度不等的特異性序列，該片段有多種調節(jié)因子的結合位點，能順式調控基因的轉錄，因此可以通過檢測啟動子的激活程度間接定量蛋白(如Ⅰ型干擾素)的表達量。

作為報告基因的條件：

編碼產物的活性不受宿主細胞的干預；

編碼產物在宿主細胞本身不存在，易區(qū)分；

編碼產物的活性測定必須快速、簡便、靈敏度高、重復性好。

常用的報告基因：

氯霉素乙酰轉移酶基因（CAT）、β-gal、熒光素酶基因（Luc）

報告基因的應用：

探討啟動子作用，細胞信號轉導，基因轉錄調節(jié)，作為分子標記，生物大分子間的相互作用，RNA干擾研究，影像技術，藥物篩選等

在如今發(fā)展起來的眾多報告基因中，熒光素酶報告基因以檢測快速、靈敏度高、線性范圍廣，且在大多數哺乳動物細胞無內源性表達等諸多優(yōu)點而備受青睞。

雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)

雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)采用螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)和海腎熒光素酶(Rellina Luciferase)組成雙熒光素酶報告基因實驗系統(tǒng)（Dual-Luciferase Reporter Assay），可以較好地體現檢測結果的精確性。

實驗中螢火蟲熒光素酶與基因表達的特定實驗條件相關，海腎熒光素酶用來做轉染的內參，以校正不同樣品之間轉染的轉染效率。螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶不需要翻譯后修飾即具有生物活性，一旦翻譯完成即具有報告基因的功能。通過加入特定的熒光素酶底物，熒光素酶與底物反應過程中會發(fā)出生物熒光，然后可以通過熒光測定儀測定反應過程中釋放的生物熒光。

與傳統(tǒng)的共報告基因（如 CAT，β-Gal，GUS）相比，雙熒光素酶報告基因系統(tǒng)更加靈敏，有望把可能削弱實驗準確性的內在因素（如培養(yǎng)細胞的數目和健康狀況的差別、細胞轉染和裂解效率的差別等）的變化降到最小，而且報告基因的檢測極為快速(30s內完成測試)、簡便。

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雙熒光素酶報告基因檢測設計圖及原理圖示

普健生物雙熒光素酶報告基因檢測服務

1. 序列分析。

2. 相關載體亞克隆。

3. 細胞培養(yǎng)及報告基因質粒、轉錄因子的共轉染。

4. 熒光素酶活性檢測。

5. 實驗報告。

客戶提交樣本要求：

客戶可以提供構建好的含目的調控元件的報告基因質粒，并提供報告基因質粒的全部相關信息。也可以提供目的調控元件序列及相關信息，由普健生物將其克隆到相應的報告基因質粒上。

普健生物的優(yōu)勢：

• 擁有長期的報告基因實驗分析經驗，幫助你合理設計實驗；

• 高效轉染試劑、高靈敏度熒光素酶檢測試劑盒，確保結果的可靠性；

• 全面的技術服務，提供詳細的原始數據和實驗報告。