我們在進行蛋白表達的時候常常會接觸到一個概念：原核表達和真核表達。起初我一直以為原核表達只是蛋白表達的一種方式，用來和真核蛋白表達進行區(qū)分。但是后來才發(fā)現(xiàn)，這個表達的意義不止于此。為了讓大家更加方便地了解相關(guān)信息，普健生物在這里和大家具體聊聊。

　　什么是有原核蛋白表達?

　　所謂的原核蛋白表達其實就是通過基因克隆技術(shù)，將外源目的基因通過構(gòu)建表達載體，并通過表達菌株，使得其在特定的原核生物中得以表達的方式。簡單來說，就是將目的基因克隆到載體的表達序列中，而后通過特定的原核生物表達出來的方式(目前最常用的表達菌株為大腸桿菌，也就是說，絕大多數(shù)的目的基因都是在大腸桿菌中表達出來的)。

　　那么，原核蛋白表達的原理是什么呢?

　　按照宿主來分，原核表達系統(tǒng)常用的有大腸桿菌表達系統(tǒng)、芽孢桿菌表達系統(tǒng)、鏈霉菌表達系統(tǒng)。而大腸桿菌因為其遺傳背景清晰，目的蛋白表達水平高、培養(yǎng)周期短、抗污染能力強等優(yōu)點，使得其成為原核表達的首選。

　　原核蛋白表達的流程為：原核表達載體構(gòu)建、轉(zhuǎn)化到高效的表達宿主中、目的蛋白誘導(dǎo)表達、細菌擴大培養(yǎng)、制備蛋白提取物、目的蛋白純化。

　　看這個過程，相信大家應(yīng)該都不會覺得困難。確實，首先通過基因工程技術(shù)，將目的蛋白基因置入到載體基因中，這個過程可以說非常的重要、而后通過一定的誘導(dǎo)手段，比如加入IPTG誘導(dǎo)劑，來誘導(dǎo)目的DNA的表達。當(dāng)?shù)鞍妆磉_出來之后，我們再通過相應(yīng)的方式，對所得蛋白進行相關(guān)的檢測，比如考馬斯亮藍染色或免疫印跡等方法。相關(guān)檢測確定蛋白合格后，再通過蛋白純化的手段提純蛋白。

　　當(dāng)然了，在這個過程中涉及到很多細節(jié)操作方面的問題，而且涉及到很多操作方面的小技巧，這些方面都需要引起關(guān)注，可以說，這些細節(jié)方面的問題是實驗數(shù)據(jù)理想與否的關(guān)鍵因素。普健生物做為一家擁有15年蛋白制備經(jīng)驗的企業(yè)，專業(yè)為廣大用戶提供原核蛋白表達服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。