無論采用哪種表達系統(tǒng)表達蛋白時，都會遇到一些問題，比如蛋白析出、蛋白表達量不高、表達條件不是最佳等等，使得所得蛋白沒有達到預期。其實，這個問題除了我們在表達步驟設計上的問題外，還有就是在一些操作細節(jié)上不太規(guī)范。那么，有沒有什么辦法來提升蛋白表達及其可溶比例呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　1、優(yōu)化密碼子。根據(jù)表達系統(tǒng)對密碼子的偏好性進行優(yōu)化篩選，提升表達效率。一般來說，我們優(yōu)先選擇那些使用頻率大于20%的密碼子，避免因為不充足的tRNA庫，導致翻譯的延遲或錯配;

　　2、降低表達速率?？梢酝ㄟ^降低IPTG的誘導濃度來降低蛋白的表達速率，通過速度的降低，使得其折疊率得到更好的平衡，最終提升蛋白的可溶性;

　　3、控制好溫度。當溫度保持在37度時，蛋白就容易形成一些包涵體，而30度的表達條件則更容易產生可溶、有活性的蛋白。所以，我們在表達蛋白的是，盡量控制溫度保持在16、18或21度(當然了，在表達過程中會產生一定的熱量，我們需要做好溫度監(jiān)控，及時予以調節(jié));

　　4、改善細胞周質載體。細胞周質環(huán)境在一定長度上制約著蛋白的形成，優(yōu)勢的話更加有利于蛋白的折疊及二硫鍵形成;

　　當然了，還有很多其他方面的原因會制約到蛋白的表達和可溶性，我們在文章：蛋白表達-哪些因素會影響到蛋白表達?中和大家具體聊過，大家有興趣的話可以具體點擊閱讀一下。

　　其實在蛋白表達的過程中，因為選擇表達系統(tǒng)的不同、操作步驟不同、技術細節(jié)調整等一系列的差異下，都會造成所表達的蛋白和預期有著一定的偏差，其實這是正常的。畢竟，制約著表達成功與否的關鍵因素實在是太多了，只有將每個細節(jié)做到完善，才能表達出我們所需的蛋白。普健生物作為一家擁有15年蛋白表達經驗的公司，專業(yè)為廣大用戶提供蛋白表達服務，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢。

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