在很多實驗過程中我們都需要用到穩(wěn)定細胞系，只是因為其構(gòu)建時間長、構(gòu)建成功率低，使得大家放棄這個方法。構(gòu)建穩(wěn)定細胞株往往耗時半年以上，別人的實驗都收尾了，而這邊卻一點動靜都沒有，可以說，其中耗費的精力足夠?qū)懸黄獪I史了。那么，如何構(gòu)建穩(wěn)定細胞株呢?今天，普健生物就和大家具體聊聊。

　　首先，我們需要知道，在什么情況下，需要構(gòu)建穩(wěn)定細胞株。

　　1、長期目的細胞研究時。一些細胞需要長期研究，通過構(gòu)建穩(wěn)定細胞株可以降低細胞變異率，極大程度上方便了實驗研究;

　　2、蛋白半衰期時間長時。當?shù)鞍装胨テ陂L時，瞬時RNA就只能通過干擾表達，但是卻無法去除已經(jīng)表達的蛋白，通過穩(wěn)定細胞株則可以更輕松實現(xiàn);

　　3、高拷貝數(shù)表達需求時。這個時候會因為一些人為原因?qū)е陆Y(jié)果不準確;

　　4、需要誘導表達時。主要是一些致死基因或者是需要空表達的;

　　5、需要用到細胞時。比如裸鼠成瘤時;

　　那么，如何構(gòu)建穩(wěn)定細胞株呢?其具體原理是怎樣的?

　　其實就是通過將外源DNA/RNA克隆到具有某種抗性基因的載體上，重組載體被轉(zhuǎn)染之宿主細胞并整合到染色體中，能夠隨著細胞分裂而穩(wěn)定地傳代下去;

　　構(gòu)建穩(wěn)定細胞株有哪些方面需要注意的?

　　穩(wěn)定細胞株構(gòu)建是一個長期過程，從質(zhì)粒包裝到慢病毒包裝，再到細胞感染以及篩選等等過程，每一步都至關(guān)重要。往往會因為一些小的失誤，導致半年時間浪費掉的現(xiàn)象也不少見，所以，細節(jié)方面一定要嚴格把控;

　　對于一些小公司來說，穩(wěn)定細胞株的構(gòu)建可謂得不償失，但是對于長期發(fā)展來說，穩(wěn)定細胞株可以說是一項必不可少的技術(shù)。相對于一般的蛋白制備手段來說，穩(wěn)定細胞株構(gòu)建不僅能有效減少批次之間的差異問題，更是能在極大程度上保證蛋白抗體的活性一致性。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供穩(wěn)定細胞株構(gòu)建服務，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。