在重組蛋白表達完成之后，最主要的一個步驟就是蛋白純化，只有通過純化后的蛋白才能投入下一輪的使用中，否則，很容易對后期的使用產(chǎn)生影響。蛋白純化需要從復(fù)雜的混合物之中將目的蛋白提取出來，而且需要保持抗體的結(jié)構(gòu)和功能。因此，了解蛋白純化的原理和過程就顯得尤為重要了。在本文中，普健生物將和大家詳細地介紹一下重組蛋白制備時蛋白純化的具體過程。

　　蛋白純化的原理：

　　蛋白純化在生物工程中是一項非常常用的技術(shù)，能夠有效提升目的蛋白的純度，對后期的使用和檢測都有著非常好的促進作用。蛋白純化需要結(jié)合樣本以及雜質(zhì)的特性來選擇合適的方法，既要保證過程的簡單，又要不對蛋白的特性造成影響。

　　當然了，對于純度要求較高的實驗來說，需要在常用純化方法中添加一個例子交換或疏水作用色譜的中間步驟。

　　需要注意的是，在蛋白純化的過程中，盡量選擇哪些步驟少的純化方式，因為每多一個步驟都會在一定程度上降低蛋白的產(chǎn)出量。

　　蛋白純化的步驟：

　　1、樣品準備。在準備好所有設(shè)備及耗材后，對目的蛋白進行預(yù)處理，去除雜質(zhì)、組織、脂肪等，保證樣品的生物活性;

　　2、準備好純化柱。將純化柱固定好，并打開封蓋;

　　3、樣品加載。將樣品從純化柱底部接入引流管，并將樣品導(dǎo)入純化柱內(nèi)部;

　　4、洗脫。將純化柱內(nèi)充滿樣品后，對其進行洗脫。比如使用乙醇將雜質(zhì)和緩沖液沖洗掉;

　　6、再生及使用。根據(jù)需要對純化柱進行再生，恢復(fù)其功能，以便于下一次使用;

　　7、收集及檢測。對收集所得上清液和洗脫液，并對所得樣品進行檢測，評估出目的蛋白純度;

　　當然了，如上的重組蛋白蛋白純化方法為一般蛋白純化流程，具體的蛋白純化需要根據(jù)蛋白的性質(zhì)和需求來進行改變，雖然說大體過程相同，但是一些細節(jié)操作方面有著一定的不同。在實際操作中，還需要控制好實驗的精確性，這樣才能在更大程度上保證蛋白的完整度和生活活性。武漢普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白純化操作，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。