重組蛋白表達(dá)和傳統(tǒng)的蛋白表達(dá)方式有一定的區(qū)別，因為其通過基因重組后表達(dá)，所以容易造成一些傳統(tǒng)表達(dá)中不會遇到的問題。雖然說這個問題是一個老生常談的話題了，但是，其重要程度卻不言而喻。那么，哪些因素會影響到重組蛋白表達(dá)的結(jié)果呢?普健生物在這里和大家具體聊聊。

　　1、載體構(gòu)建錯誤

　　其實這是一個新人最常犯的錯誤，因為弄錯讀碼框，導(dǎo)致蛋白出現(xiàn)不表達(dá)的情況。載體的構(gòu)建可以說是蛋白表達(dá)的基礎(chǔ)，需要考慮到啟動子、克隆位點、終止子、標(biāo)簽等多種因素，只有將這一步做好了，重組蛋白表達(dá)才能夠進行下去;

　　2、宿主菌選擇不當(dāng)

　　不同的菌種因為其基因型不同，適合于表達(dá)的蛋白也是各不相同的。如果選擇不當(dāng)，不僅會造成蛋白表達(dá)率低，甚至可能因為內(nèi)毒素的緣故，造成蛋白性質(zhì)改變的情況;

　　3、密碼子優(yōu)化不當(dāng)

　　不同的基因在密碼子的使用上有著明顯的偏愛性，不同物種在啟動子上也是各不相同，所以，一定要結(jié)合選擇宿主和目的基因的特性來選擇合適的啟動子;

　　4、mRNA穩(wěn)定性及結(jié)構(gòu)

　　當(dāng)mRNA穩(wěn)定性不足，或者結(jié)構(gòu)發(fā)生折疊后，會造成后期反轉(zhuǎn)錄時出現(xiàn)問題，自然也就造成了蛋白表達(dá)不準(zhǔn)確或發(fā)生沉淀等現(xiàn)象。一般來說是因為環(huán)境因素影響，或者出現(xiàn)了內(nèi)毒素等問題;

　　5、發(fā)生基因突變

　　所需表達(dá)的基因序列發(fā)生了突變，所表達(dá)出來的蛋白已經(jīng)不是我們所需蛋白了，自然達(dá)不到我們的要求了。當(dāng)然了，其他位置的基因發(fā)生突變也可能會造成蛋白不表達(dá)或表達(dá)率降低的情況;

　　總的來說，重組蛋白表達(dá)在表達(dá)過程中，很多因素都可能會造成其表達(dá)率降低甚至不表達(dá)，這個時候，我們就需要通過分析，總結(jié)出其問題所在，而后在予以整改，這樣才能保證所得蛋白達(dá)到我們的預(yù)期。當(dāng)然了，很多時候，可能就是一個小問題，需要有扎實的技術(shù)才可以，否則，非常的浪費時間。普健生物專業(yè)為廣大用戶提供重組蛋白表達(dá)服務(wù)，如果您有相關(guān)需求，歡迎來電咨詢。